VIPS 高效率的自动化细胞铺板工具

VIPS是一款基于有限稀释的基础上研发的全自动细胞铺板工具,有别于其他类型的细胞铺板工具,它完美的整合了细胞成像系统,细胞识别系统及自动加样系统,在进行铺板后能够快速识别出是否有细胞被分配到孔里,对没有分配到细胞的孔进行重复操作,直到分配有细胞为止,能够大大提高一块细胞板里只有单个细胞孔的出现概率。

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研究背景【点击观看相关视频

目前全球单抗药的研发非常火热,随着越来越多的企业以及科研机构投入大量的精力进入其中,单抗药的准入门槛也是越来越高,法规要求也是越来越严格,其中细胞株开发阶段,就有明确要求提供细胞单克隆源性的证明,而目前市面上比较火的一款细胞成像设备,通过追踪细胞生长过程并且得到完整的影响证据链,从而进行细胞单克隆源性的确认,能够很好的满足法规的要求,并且仅需一轮有限稀释,可节省1-2月的时间。但是由于FDA对有限稀释铺板的浓度限制 < 0.5 cells/孔(根据泊松分布数学统计,0.5 cells/孔浓度铺板,经过两轮有限稀释最终得到单克隆细胞的理论概率为95%),且实际概率要远远低于理论数值(详细内容见下表)

表1

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表1:0.5 cells/孔铺板,理论上有61%的孔没有细胞,30%的孔只有1个细胞,9%的孔有2个细胞及以上,大量的孔中没有细胞,大大降低了细胞板的孔利用率,且实际数值要远远低于理论数值;

表2

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表2:根据表一的数据显示,在所有有细胞的孔里,有且只有一个细胞的孔占比为77%,超过一个细胞的孔占比23%,因此经过两轮有限稀释后,得到单克隆细胞的概率为1-(23% X 23%)=94.71%,约为95%;

表3

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表3:这是两个不同的用户做的实际数值与理论数值的对比表,发现按照0.5 cells/孔铺板,每块板有细胞的孔占比要低于39%,且在有细胞的孔中,有且只有1个细胞的孔占比远远低于77%,所以想要得到更多的单克隆细胞株以备筛选,只能通过增加铺板数量来完成;

因此大多数科研人员为了得到尽可能多的单克隆细胞以备筛选,都会采取增加细胞铺板数量的方式,有些项目甚至高达上百块板子,这无疑增加了很大的工作量,而目前市面上的一些自动化移液工作站虽然能够减少人为工作量,但是对于提升铺板效率,得到更高单克隆细胞的概率没有任何作用,因此,寻求一种合理且高效的细胞铺板工具是非常有需要的,VIPS就是一款能够帮你减轻工作量,提高工作效率的产品。

 

VIPS 工作原理

 

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上图是VIPS的内部结构图,底部是一个倒置的显微镜,上方有一个TANK(可进行灭菌处理,或更换新的TANK)是用来存放细胞悬液,带涡旋混匀功能,旁边是一个连接培养基的分配器。上方的加样器和下方的镜头是固定不动的,铺板时是中间的板子移动。将空白板子放置移动平台上,下方的镜头会对板底进行成像,然后从上方Tank里滴入一滴细胞悬液(体积是纳升级别,悬液浓度计算好,确保铺板浓度<0.5cell/孔),下方镜头会再次对板底进行成像,并将两次成像的照片进行叠加,识别是否有细胞滴入孔中,当识别到孔中有细胞滴入,旁边的培养基分配器会对该孔进行补液,若软件没有识别到细胞,将会进行新的一轮加样,重复上述动作。重复4轮的分配能够达到90%以上的孔存在细胞,使孔的利用率提升3~4倍,且铺板时间少于10分钟,大大降低了铺板数量,减少了工作量,提高了铺板效率。

 

应用领域

适用于单抗领域,在细胞株开发环节,提供高效率的铺板方式,使得在单个细胞培养板中得到更多的单克隆孔,减少铺板数量。

 

 

 

品牌

Solentim

产地

英国